Restore™ Western Blot Stripping Buffer
描述
Thermo Scientific Restore Western Blot抗体剥离缓冲液能够安全高效地从硝化纤维膜和PVDF膜上清去除一抗和二抗,从而再次检测化学发光的蛋白质免疫印迹。estore Western Blot抗体剥离缓冲液的特性:
•省时—不需重新制胶电泳
•节省珍贵样品—在同一张膜上使用相同的样品重新检测
•高效—专利配方,去除效果好远优于自制缓冲液
•温和配方—在抗体剥离及重新检测时不会对靶蛋白造成伤害
•无气味—不含硫醇,无刺鼻气味
•价格经济—比其他竞争厂商的剥离缓冲液价格更低
产品细节
进行凝胶电泳并使用平行双样免疫印迹分析来检测新的一抗或抗体浓度非常耗费时间和金钱,而Restore Western Blot抗体剥离缓冲液可以消除使用化学发光免疫印迹底物检测免疫印迹过程中的浪费。Restore 抗体剥离缓冲液可以从免疫印迹中彻底、高效地从去除一抗和二抗,而不会去除或破坏已固定抗原,从而使得印迹可以被清除,而抗原可以重新检测,结果依然可靠。
使用Thermo Scientific SuperSignal辣根过氧化物酶底物进行化学发光免疫印迹检测,是当前最常见、最灵敏的方法。由于这些底物不会沉淀并与膜表面永久结合,因此化学发光法检测到的免疫蛋白印迹可使用该试剂来剥离,从而移除亲和结合的一抗和二抗。为了达到良好的效果,抗体剥离缓冲液需要具有足够的强度来分离已结合的抗体,还需要足够温和使已转移的标靶蛋白仍保留在硝化纤维膜或PVDF膜上。Restore Western Blot 抗体剥离正具有这些特点。
通过剥离和重新检测,我们无需为了对不同标靶进行检测而进行多次凝胶电泳,避免浪费稀少或昂贵的样品。一次凝胶电泳产生的一张膜可通过使用Restore Western Blot抗体剥离缓冲液来去除一抗从而消除印迹。印迹剥离仅需花费15到30分钟,具体时间因一抗的亲和能力而不同。在去除印迹后,可使用新的一抗重新结合并检测。另外,印迹剥离之后还可以使用调整后的抗体浓度来进行重新结合,以便在初次结果不佳的情况下进一步优化实验条件。
应用
•可重复使用使用硝化纤维膜或PVDF膜,通过不同的一抗检测不同标靶
•可重新检测印迹,改正或优化初次实验中无效的抗体浓度
实验方案概要
•漂洗印迹以去除化学发光底物。
•37°C(对于某些抗体室温即可)条件下,在Restore Western Blot抗体剥离缓冲液中孵育印迹5至15分钟。
•移除免疫印迹并在洗涤缓冲液(TBS-T或PBS-T)中进行清洗。
•测试抗体是否已充分移除。
•进行下一次免疫印迹实验。